胆囊良恶性肿瘤中P16蛋白表达及临床意义
【关键词】 胆囊腺瘤；胆囊癌；P16基因；免疫组化
To study the expression of p16 protein and discuss its clinical significance in benign and malignant gallbladder tumors
【Abstract】 Objective To discuss the expression of p16 protein and its clinical pathological characteristics in the benign and malignant gallbladder tumors. Methods p16 protein was detected in 46 cases of gallbladder carcinoma, 20 cases of gallbladder adenoma, 24 cases of normal gallbladder mucosa with immunohistochemical Envision. Results The positive rates of p16 protein were 53.0%, 90.0% and 92.1% in gallbladder carcinoma, gallbladder adenoma, normal gallbladder mucosa respectively. The positive rate of p16 protein in gallbladder carcinoma was higher than those in gallbladder adenoma and normal gallbladder mucosa (P<0.05). The positive rate of p16 protein in low differentiation group was significantly lower than those in middle and high differentiation groups in gallbladder carcinoma (P<0.05). The positive rate of p16 protein in S4-S5 phase was significantly lower than those in S1-S2 phase in gallbladder carcinoma (P<0.05). Conclusions The expression of p16 protein was related to benign or malignant, pathological types, differentiation and Nevin phase in gallbladder tumors. P16 protein may be an indication of diagnosis and prognosis in gallbladder carcinoma.
【Key words】 gallbladder adenoma； gallbladder carcinoma； p16 protein； immunohistochemistry
P16基因是多重肿瘤的抑制基因（MTS1），位于人类染色体qp21区位上，全长为8.5kb,其编码分子量为15.84kD的蛋白质P16，P16基因是一种CDKS抑制蛋白基因，其表达蛋白通过与CDK4的特异的结合来抑制该蛋白激活酶的活性，阻止细胞从G1期到S期，从而抑制细胞增殖［1］。当其发生突变或缺失时，调控细胞周期的抑制因子P16不能正常表达，导致细胞增殖失控，而发生肿瘤形成［2］。本文探讨其P16蛋白表达与胆囊肿瘤的发生、发展关系及临床病理特征。
1 材料与方法
1．1 材料
由上海市瑞金医院集团闵行医院病理科提供2001年1月～2005年12月外科手术存档蜡块标本，胆囊癌46例，其中乳头状腺癌16例，管状腺癌24例，粘液腺癌6例。胆囊腺瘤20例。对照组胆囊正常黏膜24例。所有病例均经HE染色病理诊断证实。
1．2 方法
石蜡存档标本分别切片，厚4μm,分别作免疫组化既用型二步法染色。用已知的阳性切片作阳性对照。P16蛋白的阳性表达定位于细胞浆或细胞核内呈棕黄色颗粒。阳性细胞数的细胞核或浆有棕色＜25%及无着色为（-）；阳性细胞数在25%～50%为（+）；阳性细胞数＞50%为（++）。
1.3 统计学方法
统计学处理采用卡方及秩和检验。
2 结果
2．1 P16蛋白的表达与胆囊良恶性病变中的关系
见表1。P16蛋白在胆囊癌组中阳性表达率53.0%（24/46），与胆囊良性病变组的比较差异有显著性（P＜0.05），而胆囊腺瘤组与胆囊正常黏膜间的阳性率差异无显著性（P>0.05）。表1 P16蛋白表达与胆囊良恶性病变关系（略）注：与胆囊黏膜组比较，?P＜0.05，△P＞0.05
2．2 P16蛋白的表达与胆囊癌病理分型及分化程度的关系
见表2，P16蛋白在胆囊粘液腺癌中阳性表达34.0%(2／6),与胆囊管状腺癌组和乳头状腺癌组比较有明显差异性(P＜0.05)。在低分化癌组的阳性表达比高、中分化癌组低，差异均有显著性（P＜0.05），提示P16蛋白表达与胆囊癌组织学类型的恶性程度及分化程度相关。表2 P16蛋白表达与癌病理分型及分化程度的关系（略）注：P＜0.05
2．3 P16蛋白的表达与Nevin［3］分期的关系
P16蛋白的表达在胆囊癌S4～S5期中阳性表达29.0%（4/14），与S3期和S1～S2期间均有差异性，提示了P16蛋白表达在胆囊癌的病程晚期表达率更低（P＜0.05），见表3。表3 P16蛋白表达与Nevin分期的关系（略）注：P<0.05
3 讨论
肿瘤的发生发展是一个复杂的多阶段过程，多种基因和多种分子水平变化与之密切相关。不仅同细胞程序性凋亡及肿瘤的发生、发展、浸润、转移等有密切相关，同时也参与细胞间的信息传递，或成为细胞内的第二信使，并行使辅助分子功能，将细胞外信息传至细胞质及细胞核，调控基因表达。
胆囊癌占整个消化系统恶性肿瘤的第五位，与肝外胆管癌相比其临床症状相对稳袭，多表现为腹胀、嗳气等一般消化症状，腹痛黄疸少见，不易及早发现，且转移发生早，故预后差。与预后有关的因素目前已知的有临床分期、手术切缘、组织学分级、DNA含量的测定及多种癌基因异常表达等［4］密切相关。
