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EM发酵秸秆饲料的应用研究

作者:未知
出处:论文网
时间:2006-01-26

第二章 实 验 部 分

一,引言

EM液发酵秸秆饲料是一种新型的微生物技术,EM是一种把厌氧菌和好氧菌共存的活菌制剂。依靠
改善动植物体内各环境微生物而发挥作用。组成EM有效微生物菌液的有效微生物群是由光合菌,
乳酸菌,纤维素分解菌,半纤维素分解菌,酵母菌,放线菌,固氮菌等5个科,10个属的80多种有
效微生物组合而成,通过这些对分解秸秆有效,对动物生长和防病有益的微生物群的作用,在一
定温度和厌氧条件下实现秸杆的生物转化和饲料转化。

目前,在全国不少地区,大量农作物秸杆没有得到充分利用,有的堆积在田埂和路旁,多数在田
间付之一炬。这种处理方法不但浪费资源而且会造成严重的环境污染,破坏生态平衡。如果能把
秸杆通过科学的加工与调制,即可用来饲养牛羊等草食家畜,发展秸杆畜牧业,这是一个一举多
得的“绿色事业”,本试验取南阳市周围农村的玉米秆,花生秧,稻草。研究EM发酵各种秸秆的
作用效果和最佳作用条件,使EM发酵秸秆饲料能够推广应用。

二,材料和方法

材料:EM原液,南阳市周边农村的玉米秆、稻草、花生秧。

方法:本试验测试项目为:

[1]水分 [2]粗脂肪 [3]粗纤维 [4]粗蛋白 [5]灰分 [6]中性洗涤纤维 [7]酸性洗涤纤维

(1)水分的测定

[1]仪器:粉碎机,烘箱,天平,称量瓶,干燥器

[2]步骤:称2g试样置100℃---105℃干燥恒重后称量瓶中,在100℃----105℃度烘箱中干燥3---4
个小时,取出置干燥器中,冷却至室温,称重。再于相同温度下干燥1小时左右,同上操作至恒重。

[3]计算 水分(%)=100%(W1—W2)/(W1—W0) 

W0—瓶重(g), W1—干燥前试样与称量瓶重(g) ,W2—干燥后试样与称量瓶重(g)

(2)粗脂肪的测定:

[1] 原理:乙醚提取试样,称重提取物的重量,除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶
绿素等。固而称粗脂肪。

[2] 仪器:a、粗碎机 b、分样筛0.45mm c、水溶锅 e、恒温烘箱50~500℃ f、索氏脂肪取器(带
球形冷凝管)100或150ml . g、滤纸(中速脱脂).

[3]试剂:无水乙醚(分析纯)

[4]测定步骤:

a、 索氏抽取器应于燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105℃烘箱中烘60 min至干。干燥器中冷
却30 min,称重。再烘干30min,同样冷却、称重,再次重量之差小于0.0008g为恒重。

b 称取试样125g(准确为0.0002g) 于滤纸筒中,或用滤纸包好.放入105℃烘箱中烘干60min。干燥
器中冷却30min,称重再烘干30min,同样冷却称重,再次重量之差小于0.0008g为恒重.

c、 称取试样1~5g(准确度0.0002g),于滤纸筒中,或用滤纸包好,放入105℃烘箱中,烘干2h(或取
测水分后的开试样,折算成风干样重).滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度。滤纸包长度应全部浸
泡于乙醚中为准,将滤纸筒或包放入抽提管)在抽提瓶中加无水乙醚60~100ml.在60~75℃水浴上
加热,使乙醚回流,控制乙醚回流次数为每小时约10次,共同回流约50次或检查抽提管流水的乙
醚挥发后不留下油迹为抽提终点。

d 、取出试样,仍用原撮器回收乙醚直到抽提瓶几乎全部收完,取下抽提瓶,在水浴上蒸去残余
乙醚.擦净瓶外壁,将抽提瓶放入105℃烘箱中烘干2h,干燥器中冷却30min称重,再烘干30min,同
样冷却称重。两次的重量差小于0.001g为恒重。

[5]计算: 粗脂肪(%)=100%(M2—M1)/M 

M—用干试样重量 M1—已恒重的抽提瓶重量(g)

M2—已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量(g )

(3)粗纤维的测定:

[1]原理: 试样经酸、碱处理后,使淀粉、半纤维素、蛋白质、脂肪等变成可溶性物质而被除去,
残剩的纤维素和其他植物质的膜壁等。统称为粗纤维素,称重定量。对含油脂较高的试样可用硝
酸—醋酸处理试样。

[2] 试剂:A、1.25% H2SO4 溶液。B、1.25% NaOH 溶液 C、乙醚 D、乙醇

[3]测定步骤

 准确称取2-3g试样,置入500ml三角瓶中,加入100ml 乙醚,盖严,静置过夜,以除去脂肪。
用倾泻法除去乙醚层,再用乙醚洗涤残渣,残存少量乙醚于水浴中蒸发除去(或直接取测定粗脂
肪后的残渣进行测定)。

200 ml 1.25%硫酸溶液煮沸半小时,抽滤(滤器可用布氏漏斗,上铺亚麻布或府绸或用1-2号耐
酸玻璃过滤器),用热水洗涤到滤液呈中性。

将残渣用1。25%NaOH溶液转入500ml烧杯中,补足1.25% NaOH 溶液至200ml 盖上表面皿煮沸半小
时(小火)。用古氏坩埚抽滤(30 ml, 预先加入酸洗石柿悬乳液30ml(内含酸洗石柿0.2-0.3g)
再抽干,石棉厚度均匀,不透光为宜,上下铺两层玻璃纤维有助于过滤。)用热水洗涤至滤液呈
中性,再用乙醇,乙醚洗涤。

将古氏坩连同纤维素,于100---105℃干燥至恒重W1,然后燃烧至恒重(W2)

[4]计算。粗纤维素(%)=100%(W1—W2)/W W——试样重量(g)

(4)粗蛋白的测定

[1] 原理:将试样与浓H2SO4共热消化,使Pr分解其中N与H2SO4化合成(NH4) 2SO4,然后碱化蒸馏使
氨游离,用标准酸接收,过量酸用标准碱滴定。

总氮量除Pr外,还有氨基酸、酰胺、核酸中的氮,换算成蛋白质,称粗蛋白。

[2] 试剂:a、浓H2SO4 b、K2SO4 c、 CuSO4.5H2O d、 H2O2 (30%) e、NaOH(30%) f、 0.1 
(NH4)2SO4 g 、 0.1 N NaOH h、 0.1%甲基红指示剂

[3] 步骤:

a 、 试样消化,取2g试样置入250ml凯氏定氮瓶中,加3gK2SO4 和1g CuSO4,加20ml浓H2SO4 ,
瓶口安放小三角漏斗,于电炉上加热消化。若消化色泽难退,则冷却后,加3---5mlH2O2,继续
加热,直至清彻透明为止。冷却,转入100ml容量瓶中(先加20ml水),充分洗涤凯氏定氨瓶,冷
却至室温,再用水定容至刻度摇匀。 

b 加碱蒸馏:吸取50ml稀释消化液,置入500ml平底烧瓶中,加约100ml水和数粒沸石,加入60m
l30%NaOH液.或在烧瓶上安一分液漏斗加碱,立即盖严,蒸馏约45分钟(或蒸出原液体积的1/3)
,接收瓶中先加入25或50ml 0.1Na2SO4。.

c、滴定,蒸后,用水洗涤冷凝器,取出接收瓶,加4滴0.1%甲基红指示剂,用0.1NaoH滴定至黄色。

d计算,含氮(%)=[(NV)H2SO4 -(HV)NaOH]x0.01401x(100/50)x(1/W)x100%

0.01401—氮的mg当量, 100/50—稀释倍数, W—样重

粗蛋白(%)=6.25X含氮(%)

e.<5>灰分的测定

①.原理:试料在550℃燃烧所得残渣,用质量百分率来表示,残渣中主要是氧化物、盐类等矿物
质,也包括混入饲料中的砂石、土等,故称粗灰分。

②.仪器:a ,粉碎机 b, 分样筛 孔径为0.45mm(40目) c,分析天平 0.0001g d. 高温炉
550+-20℃ e 坩埚瓷质容积50ml f, 变色硅胶作干燥剂

③测定: 将干净坩埚放入高温炉,在550℃下灼烧30min,取出在空气中冷却约1min,放入干燥
器冷却30min,称量,再重复灼烧,冷却,称重,直至两次质量差小于 0.0005g为恒重。在已恒
重的坩埚中称取2---5g (灰分质量0.05g以上).试样,准确至0。0002g,在电炉上小心碳化,在
炭化过程中,应将试料在较低温度状态加热灼烧至无烟,然后升温灼烧至样品中基本无炭粒。再
放入高温炉,于550℃下燃烧3h,取出,在空气中冷却约1min,放入干燥器是冷却至30min,称重
,再同样燃烧1h,冷却,称重,直至两次质量之差小于0.001g为恒重。

结果计算和表述

粗灰分(%)=(m2--m0)/(m1--m0) *100%

m0——恒重空坩埚重 m1—加试样品的坩埚重 m2—灰化后坩埚重

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关键字:EM 秸秆 粗蛋白 生物转化
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