四甲基偶氮唑盐比色法测定Vero毒素-1的CD５０
3 讨论
活细胞在生长和增殖过程中，线粒体内的脱氢酶可以将黄色的四甲基偶氮唑盐分解成蓝紫色的Fonnazan，生成的Fonnazan量的多少与细胞的数量和细胞的活性成正比。但是，Fonnazan不溶于水，溶于有机剂［１０，１１］。本实验室在细胞加入四甲基偶氮唑盐，经培养产生Fonnazan后采用二甲基亚枫裂解细胞，并将沉淀在细胞内的不溶性Fonnazan溶解，然后才能测定其OD值。
本实验根据活细胞的这一特征，建立了测定vero毒素-1 CD５０的四甲基偶氮唑盐法，该方法与传统的３Ｈ-Tdr掺入法相比有许多的优点，如方法简便、避免使用同位素以及结果容易读取等；与肉眼目测法相比，该方法重复性好，不受实验者工作经验等主观因素的影响。本方法同样适用于其他毒素细胞毒性的测定，值得推广。
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