克林霉素诱导实验在阳性球菌药敏实验中的应用
2.2 双纸片扩散法［5,6］
据2004年NCCLS推荐在MH琼脂平板上，分别贴红霉素(15μg/片)和克林霉素（2μg/片）纸片。两种纸片距离分别选用15mm、26mm，35℃培养16～18h。用常规法取2纸片边缘距离，若靠近红霉素纸片处克林霉素纸片抑菌圈缩小或呈“D”形状，则显示为诱导型耐药。
2.3 统计学方法
利用SAS8.2软件对实验结果进行χ2检验。
3 结果
见表1。对克林霉素未进行“D”实验耐药率与“D”实验后合计耐药率进行χ2检验，P＜0.05，差异有显著性。表1 红霉素、克林霉素药敏结果及D试验统计分布（略）注：ESCLS 红霉素、克林霉素均敏感；ERCLR 红霉素、克林霉素均耐药；ERCLS 红霉素耐药、克林霉素敏感
纸片间距分别为15mm和26mm时诱导克林霉素耐药的发生情况分布见表2。表2 两纸片间距诱导克林霉素耐药的发生情况分布（略）
在15mm和26mm时,阳性检出率经χ2检验，P＞0.05,D实验结果差异无显著性。
4 讨论
本实验结果显示金黄色葡萄球菌可诱导克林霉素耐药的发生率为65%，较凝固酶阴性球菌（41%）和β溶血链球菌（34%）高，由579株阳性球菌对克林霉素耐药性的分布情况可知，红霉素敏感株中未出现克林霉素诱导耐药，而红霉素耐药株中，克林霉素耐药株也较多，且固有耐药株占大部分，诱导耐药株也有相当比例。总体耐药性与固有耐药性之间的差异有显著性意义，故有进行“D”实验的必要性。纸片扩散法测定时，抑菌圈结果于两纸片间距在15mm时较26mm略明显；但差异无显著性；D实验被用于临床实验室检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性，简单易行。能很好的避免不恰当的使用克林霉素导致治疗的失败。目前微量稀释法和机器法药敏尚不能检出此种诱导耐药，如不做实验，则不能正确报告。所以临床微生物实验室应加强克林霉素诱导耐药性的检测，以保证克林霉素耐药性检出的准确性，指导临床医生合理使用抗生素。
【参考文献】
1 赵先颖，徐元宏，江晓平.医院感染葡萄球菌菌种变迁与耐药近况.中国微生态学杂志，2003，1：40-43.
2 李智山.葡萄球菌医院感染及耐药谱分析.中华医院感染学杂志，2004，14(6)：691-693.
3 沈定霞，罗燕平，徐雅萍，等.葡萄球菌对红霉素和克林霉素的诱导耐药性研究.中华检验医学杂志，2005，18(4)：400-403.
4 NCCLS.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing(S).14th informational supplement M100-S14，2004，24:40-47.
5 应春妹.双纸片法检测克林霉素诱导耐药性.中华抗感染化疗杂志，2005，3：171-173.
6 周小梅.葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药观察分析.深圳中西医结合杂志，2005，1(3)：132-135.
