清血糖浆药理作用的实验研究
2.2 右旋糖酐所致的小鼠全身瘙痒实验 取50只昆明种小鼠,雌雄兼用,随机分为空白对照组,清血糖浆高、中、低剂量组,扑尔敏组。空白对照组、清血糖浆高、中、低剂量组给药同前;扑尔敏组按1.7mg/kg给药,使用前用蒸馏水溶解,每次灌胃体积均为0.5ml/只。各组每日灌胃1次,连续7天。于末次给药后30min,给各小鼠尾静脉注射0.025%右旋糖酐0.05ml/10g,以小鼠前爪搔抓头部,后爪搔抓躯干,嘴咬全身各部位作为瘙痒指针,记录30min内小鼠搔抓的次数及瘙痒持续的时间,以此作为评价药物的止痒作用,各组进行组间t检验,结果见表4。
表4 清血糖浆对右旋糖酐所致的小鼠全身瘙痒的止痒作用 (x±s)
注:与空白对照组相比★P<0.01;与扑尔敏组相比■P>0.05
经统计学处理:清血糖浆高、中、低剂量组能够显著的减少右旋糖酐所致的小鼠全身瘙痒的次数及持续时间,且表现出了较好的量效关系。阳性对照组扑尔敏组也能显著的减少右旋糖酐所致的小鼠全身瘙痒的次数及持续时间。清血糖浆高、中、低剂量组在减少小鼠全身瘙痒的次数及持续时间方面与扑尔敏组相比在统计学上无明显差异。
2.3 肥大细胞实验
2.3.1 分组 大鼠50只,随机分入空白对照组,色甘酸钠组,清血糖浆高、中、低剂量组,每组10只。模型对照组、色甘酸钠组给生理盐水3ml/只灌胃;清血糖浆高、中、低剂量组按表5所示给药,每次灌胃体积均为3ml/只。各组每日灌胃一次,连续7天。
2.3.2 制备抗血清 取4只大鼠,体重150~200g,肌注卵蛋白25mg/kg,同时腹膜内注射免疫佐剂百白破疫苗2×1010个/只,正常饮食、饮水,12天后眶内采血,制备大鼠抗卵蛋白血清,置于-20℃冰箱保存备用。
2.3.3 方法 除空白对照组头皮下注射生理盐水外,其余各组均头皮下注射抗卵蛋白血清1:5稀释液0.25ml,48h后各组动物口服给药(色甘酸钠按25mg/kg静脉给药),给药后50min静脉注射1%卵蛋白0.5ml,30min后处死大鼠,剥离颅骨置于95%的乙醇中,1h后取出移入无水甲醇中,再用0.18%中性红染色30min。染色后用盐水冲洗并剥离骨膜,置于载玻片上封固。光镜下计数200个肥大细胞中脱颗粒的细胞数目。
2.3.4 结果 见表5。
表5 清血糖浆对大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒的影响 (x±s)
注:与空白对照组相比★P<0.01;与色甘酸钠组相比■P<0.01
经统计学处理:清血糖浆高、中、低剂量组能够显著地抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒,阳性对照组色甘酸钠组也表现出了相同的功能。但清血糖浆高、中、低剂量组在抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒方面与阳性对照组色甘酸钠组相比有明显的差异(P<0.01)。
3 清血糖浆止痒机理的探讨
通过上述实验研究表明清血糖浆至少在以下3个方面阻断或干扰了瘙痒的产生:(1)稳定肥大细胞膜作用:通过稳定肥大细胞膜抑制肥大细胞脱颗粒,释放瘙痒介质。(2)抗组胺作用:能够直接拮抗组胺介导的瘙痒。(3)增强红细胞清除循环免疫复合物的功能。
临床上血虚风燥型瘙痒患者可表现出红细胞免疫学方面的异常,如陈如泉[4]等对临床血虚证患者血液标本进行检测后发现血虚证患者的红细胞C3b受体花环率明显减少,而红细胞免疫复合物花环率则明显升高,这提示血虚证患者的红细胞免疫功能呈低下状态,血虚证的病理实质中包含着红细胞免疫功能的低下。而本药能增强红细胞清除循环免疫复合物的功能,并通过这一机制减少抗原抗体复合物的沉积,避免沉积的抗原抗体复合物激活补体释放过敏毒素(如C3a、C4a、C5a)作用于肥大细胞或嗜碱性粒细胞上的相应受体,促使其脱颗粒,释放瘙痒介质,而诱发或加重瘙痒。这应该是本药对血虚风燥型瘙痒疗效突出的一个重要原因。
综上所述,本药具有抗变态反应,增强红细胞免疫功能,能多途径、多靶点的发挥止痒作用,与单纯抗组胺药相比,本药具有更加强大的止痒作用,且本药还能提高血虚小鼠的RBC、WBC的数量,Hb的含量,这可能在改善皮肤的营养状态,促进皮肤功能的恢复方面也发挥了一定的作用。
【参考文献】
1 王玉英.清血合剂治疗皮肤瘙痒的临床观察.湖北中医杂志,2003,25(3):29.
2 陈奇.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1994,1010.
3 郭峰.红细胞免疫及其调节功能测定方法.免疫学杂志,1990,6(1):60.
4 陈如泉.血虚证的临床及实验研究探讨.中国中西医结合杂志,2001,21(6):473.