人源抗狂犬病毒特免血浆筛查方法的建立
2.2 不同厂家ELISA试剂盒检测结果比较
经小鼠中和法测得SNT效价（≥10 IU/ml）样品与其他三个生产厂家试剂盒检测结果比较，见表2。表2 不同厂家ELISA试剂盒检测结果比较 (略)注：样品1～7号为同一供浆者不同次血浆样，8～9号为同一供浆者。不同次血浆样中，小鼠中的样品作过一次。海泰批号为200801
从表2可以看出，采用B、C、D厂家ELISA试剂盒经中和法测得SNA≥10 IU/ml的9份血样进行检测，结果显示，B、D厂家ELISA试剂盒检测结果与中和法SNT值接近。
2.3 不同ELISA试剂盒标准曲线对比
以9008批HRIG为工作参考品，用不同ELISA试剂盒测得的线性关系比较，见表3。表3 不同ELISA试剂盒标准曲线对比（略） 注：工作参考品为98008 HRIG冻干品经小鼠中和法测得效价为60 IU/ml
从表3可以看出，以HRIG（批号：98008）为工作参考品的检测结果可以看出，B、D ELISA生产厂家的试剂盒线性关系较好（分别为：r＝0.997，r＝0.996），可以作为初筛狂犬免疫血浆的首选试剂。
3 讨论
ELISA检测方法与小鼠中和法的比较：早在20世纪末国内就有人［4］将ELISA与小鼠中和试验进行了比较，两者已经有了很好的一致性。苏军英等［5］在vero细胞狂犬病疫苗免疫人的效果观察中，用ELISA与MNT、RFFIT三种方法进行比较，也有相似的结果［6，7］。在实验中测定的结果也证实上述两种方法具有良好的正相关性。同时通过在ELISA实验中同步设立了已知的SNT效价的阳性对照作为工作参考标准，最大限度地减少其他因素对实验结果的影响。针对大规模人源性狂犬病毒特异性免疫血浆的采集工作的需要，实验中根据稀释阳性对照标准的ELISA测定结果绘制标准曲线作为参照，建立了有效的收浆方案［8］，从而克服了小鼠中和法诸如检测周期长、实验条件复杂、费用高、其检测样品受到限制等不利于采浆站大规模初筛特异性免疫血浆的要求。为加快HRIG制品的研制、开发提供了技术条件。
【参考文献】
1 WHO Expert Committee on Rebies. Technical report series 709. Geneva，1984, 32-33.
2 Benjavonkulchai M, Koprowski C, Limsuwun K, et al. An immunogenicity and efficacy study of purified chick cell culture rabies vaccine manufactured in Japan. Vaccie，1977, 15(17-18):1818-1819.
2 Recommendations of the immunization practices advisory committee(ACIP). Morbidity and mortality weeky report，1991, 40.
4 中华人民共和国药典（附录ⅪJ），2005,176.
5 苏军英，陶小润，孙承梅.人用狂犬病毒免疫抗体检测方法的比较.中国生物制品学杂志，1999,12（4）：236-237.
6 文洁，任雅萍，周学良.ELISA用于人血清抗狂犬病毒抗体的检测.中国人兽共患病杂志，1989,5（6）：7-8.
7 Mebatsion T, Sillero-zc, Gottelli D. Detection of rabies antibody by ELISA and RFFIT in unvaccinated dogs and in the endangered simien jackal(Canis simensis) of Ethiopia. Zentralbl Veterinarmed B，1992, 39(3)：233-235.
8 周志军，尹斌，朱华松，等.ELISA抗体检测试剂盒在狂犬病毒特免血浆筛选中的初步应用.微生物学免疫学进展，2005,33（2）：45-48.
