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全自动生化分析仪的试剂的合理排序

作者:杨燕,孙荣同,丛栋滋
出处:论文网
时间:2007-09-26

  2.2.3  按检测反应的性质 

  (1)终点法,速率法,免疫比浊法;(2)双缩脲法测TP放于末位,利用双缩脲试剂去蛋白去污的作用;(3)苦味酸试剂污染较重,且不易清除,尽量往后面放。

  2.3  实验结果

  2.3.1  终点法 

  见表2、表3。表2  pH值的影响(略)表3  反应物干扰(略)

  2.3.2  速率法 

  见表4、表5。表4  pH值的影响(略)表5  反应物的影响(略)

  3  结论与分析

  3.1  结论 

  检测试剂合理有序排列,能减少探针携带误差,提高检测结果的准确度。

  3.2  分析

  3.2.1  终点反应 

  (1)pH值改变:反应物之间,反应物缓冲液之间因携带误差而使pH值改变,反应达不到终点。如双缩脲法测血清总蛋白,若其他条件相同,反应在碱性(pH值8~9)条件时,蛋白肽键(―CONH)才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反应,完全测出血清蛋白的总量。若pH<8时,总蛋白测定结果偏低,直接影响球蛋白、白蛋白/球蛋白的结果。(2)缓冲液混入反应物:磷酸盐缓冲液混入无机磷试剂,会使检测结果偏高。应将含有磷酸盐缓冲液的检测项目放于无机磷后检测。如GOD-POP法测Glu。

  3.2.2  速率法反应 

  (1)辅酶结构:辅酶参与反应时,其还原型、氧化型在340nm处曲线变化是相悖的,由携带误差使上升反应或下降反应不彻底,导致无效值出现。(2)最适pH值:酶活力测定在最适pH值时,反应最快,灵敏度最高,但是因为缓冲能力有限,可因携带误差使酶促反应出现无效值。大多数酶反应pH值在6.0~7.5之间;ALP、γ-GT、LDH须在碱性条件下最适宜。

  3.2.3  反应物间的作用 

  (1)CK检测不应在ALP、Ca检测之间,因CK反应液中加入EDTA-Na,能抑制ALP活性,结合Ca而使结果偏低。(2)ALT、AST反应液中均含有LDH,可干扰LDH检测结果。(3)Cho,Glu,UA,HBDH用PBS缓冲液,干扰无机磷测定。(4)BUN酶法测定因谷氨酸脱氢酶(GLDH)消耗NADH,不易放在底物NADH如ALT、AST项目前检测。(5)同时测定一个项目的不同标本(血、尿、脑脊液等):应将不同标本放入不同通道测定。临床生化检测应注重试剂的合理排序,严格按规程操作,及时清除试剂瓶口处结晶,以免导致试剂水平检测错误;对于稳定性差的试剂尽量减少与空气接触面积;有沉淀、变浑浊及颜色异常改变的试剂及时更换,尽量清除无效值,提高生化检测的实效性;为临床诊断发挥其应有的作用。

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